酵母扩大培养的关键在于使用优良的单细胞出发菌。此出发菌应先经生理特性和生产性能鉴定,然后投入应用,并保证在扩大培养过程中无污染、无变异。每一步扩大后的残留液都应进行无污染和无变异的检查。

 

　　2.培养温度

 

　　培养前期,为了提高酵母增殖速率,缩短培养时间,实验室扩大培养阶段,采用酵母最适繁殖温度25℃。而后每扩大一次,温度均相应有所降低,使酵母逐步适应低温发酵的要求。但每次降温幅度不能太大,以防酵母活性受到抑制。随着培养温度的降低,培养时间视稀释倍数而相应延长

 

　　3.培养时间

 

　　为了缩短酵母生长停滞期和缩短培养时间,每阶段扩大培养的酵母,最好在酵母对数生长期进行移植。此时的酵母出芽率最高,死亡率最低,移植后酵母迅速增殖。

 

　　4.通风供氧

 

　　酵母增殖是依靠糖的生物氧化,即呼吸作用而获取能量的。因此,培养初期,培养液中葡萄糖含量高,受克勒勃屈利效应(CrabreeEifect)影响,连续通风,酵母的增殖效果未必如理想中那么好,以间歇通风为宜。从三角瓶到卡氏罐培养阶段,一般是依靠定时摇动容器(或使用振荡器),使酵母液与空气接触,容器上部空间的空气也使酵母与氧有接触的机会。移植到生产现场扩大培养后,即需注意通风供氧。每次追加麦汁后均需适量通风,使发酵麦汁具有8-10mg/L.的含氧量。传统的做法,上面酵母多采用连续通风,而下面酵母则不采用连续通风,这可能与两者的发酵温度不同(20℃与9℃)和发酵时间不同(3d与10d)有关。

 

　　5.营养物质

 

　　培养酵母,应使用营养丰富的优质培养基。实验室培养阶段应选择a-氨基1氮含量高的优级麦芽,不加辅料,自制培养基。生产现场的扩大培养则采用生产麦汁,麦汁的a-氨基氮应保持在200mg/.以上。

 

　　6.扩大培养倍数

 

　　实验室阶段,由于培养温度高,增殖时间短,无菌操作条件较好,扩大倍数可以较高,例如10-20倍,甚至更高一些。汉森罐以后的扩大培养,由于温度逐步降低,酵母倍增时间延长,为了很快地使酵母起发,保持酵母的生长伪势,增强其抗污染能力,扩大5倍左右为宜。根据这一原则,中间扩大培养城的数量和容积也就容易确定了。

 

　　7,麦汁无菌

 

　　生产现场扩大培养一般都采用生产现场的冷麦汁。此冷麦汁经过管道容易青况下更易染菌。因此,应采取措施,防止染菌。